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乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基用途及其使用方法
更新時間:2011-10-20   點擊次數(shù):4788次

用途:用于多管發(fā)酵法測定食品、純凈水和一次性使用衛(wèi)生用品中大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌(GB/T 8538-2008和GB15979-2002)。
原理:蛋白胨提供碳源和氮源滿足細菌生長的需求;豬膽鹽可抑制革蘭氏陽性細菌的生長;乳糖是大腸菌群可發(fā)酵的糖類;溴甲酚紫是pH指示劑,酸性呈黃色,堿性呈紫色。
配方(每升):
蛋白胨20g
豬膽鹽5g
乳糖10g
溴甲酚紫0.01g
zui終pH 7.4±0.2
使用方法:
1、稱取本品35克(單料)或70克(雙料)加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至*溶解,分裝于帶有小倒管的試管中,培養(yǎng)基每管10mL,115℃高壓滅菌15min。
2、樣品的處理及稀釋。略。
3、(1)食品:取1mL稀釋液,加入到含有10mL乳糖膽鹽培養(yǎng)基的試管中,根據(jù)食品衛(wèi)生標準要求或對檢樣污染情況的估計,選取三個合適的稀釋度每個稀釋度接種三管。將待檢樣品接種于乳糖膽鹽發(fā)酵管內,接種量在1mL以上者,用雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管,1mL及1mL以下者,用單料乳糖膽鹽發(fā)酵管。
(2)一次性使用衛(wèi)生用品:取樣液5mL接種50mL單料乳糖膽鹽發(fā)酵管。
4、將試管放入到培養(yǎng)箱中36±1℃培養(yǎng)24h。
5、觀察結果。如所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產(chǎn)氣,則可報告為大腸菌群陰性,如有產(chǎn)氣者,則要進行分離、證實試驗。
質量控制:配成的培養(yǎng)基呈紫色,質控菌株接種后,于36±1℃培養(yǎng)24h結果如下:

         菌 名        菌 號 生長狀況 產(chǎn)酸 產(chǎn)氣
大腸埃希氏菌 ATCC25922 良好 + +
金黃色葡萄球菌 ATCC6538 被抑制 - -

貯存:貯存于避光、陰涼干燥處,用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。

 

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