簡(jiǎn)要描述:
甲醛脫氫酶(FDH)測(cè)試盒是一種能與蛋白質(zhì)、核酸和脂類產(chǎn)生非特異性反應(yīng)的活潑化合物,對(duì)所有生物都具有很高毒性。甲醛脫氫酶作為含鋅中等鏈醇脫氫酶(ADH)的家庭成員之一,廣泛存在于原核和真核生物中,該酶能利用NAD+作為輔酶,將有毒的甲醛氧化,是甲醛氧化途徑中的關(guān)鍵酶。
更新時(shí)間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:926
商品詳情:
甲醛脫氫酶(FDH)測(cè)試盒測(cè)定意義
甲醛是一種能與蛋白質(zhì)、核酸和脂類產(chǎn)生非特異性反應(yīng)的活潑化合物,對(duì)所有生物都具有很高毒性。甲醛脫氫酶作為含鋅中等鏈醇脫氫酶(ADH)的家庭成員之一,廣泛存在于原核和真核生物中,該酶能利用NAD+作為輔酶,將有毒的甲醛氧化,是甲醛氧化途徑中的關(guān)鍵酶。
測(cè)定原理
甲醛脫氫酶催化甲醛和NAD+產(chǎn)生NADH,在340nm處的吸光值會(huì)增加,測(cè)定340nm處的吸光值變化,可計(jì)算得到甲醛脫氫酶的活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、離心機(jī)、酶標(biāo)儀、96孔板、蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1瓶(棕色),4℃避光保存。臨用前加入667μL無(wú)水乙醇,蓋緊后充分混勻,再加入9.333 mL蒸餾水混勻,避光保存。
試劑四:粉劑×1管,4℃避光保存。臨用前加1 mL蒸餾水,充分溶解。
標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1瓶,臨用前加10 mL蒸餾水,充分溶解。1μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液,4℃避光保存。
商品屬性:
貨號(hào) | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 |
YSH3336 | 100管/96樣 | 微量法 |
YSH3336-1 | 50管/48樣 | 紫外分光光度法 |
測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到570 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 空白管:取EP管,加入10μL蒸餾水,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次,于570nm測(cè)定吸光值,記為A空白管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測(cè)完。
3. 標(biāo)準(zhǔn)管:取EP管,加入10μL標(biāo)準(zhǔn)品,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次,于570nm測(cè)定吸光值,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測(cè)完。
4. 測(cè)定管:取EP管,加入10μL上清液,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次,于570nm測(cè)定吸光值,記為A測(cè)定管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測(cè)完。
注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需要測(cè)定一次。
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